Примикс Lnc-RT HeroTM i (с gDNase) супер для синтеза cDNA перво-стренги от lncRNA Cat.No.RTL-09098/09099

Lnc-RT HeroTM i (с gDNase)

Супер примикс для синтеза cDNA перво-стренги от lncRNA

Cat.No.RTL-09098/09099

Описание:

Lnc-RT HeroTM i (с gDNase) обратная система транскрипции специально начатая для lncRNA быстро для того чтобы извлечь генное загрязнение ДНК. смешивание 5×gDNase может быстро извлечь остальной геном в РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЕ на 42°C на 2 минуты, эффектно избегая взаимодействия генома на результатах qPCR.

Смешивание 5×L-RT HeroTM содержит обратный Transcriptase Foregene LncRNA специально начатое Foregene, которое новый Н тип обратного transcriptase специфически для lncRNA и других шаблонов длинной РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ сложных, с более сильным сродством РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ и более высокой эффективностью записи реверсирования. Оптимизированная система делает обратный тариф транскрипции более быстро и может легко транскрибировать шаблоны РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ с высоким содержанием ОБЩЕГО РУКОВОДСТВА и сложной вторичной структурой. Первый синтез cDNA стренги можно завершить на 42°C в 15 минутах.

Спецификации:

25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns

Компоненты набора

Данные по наборов компонентные

Смешивание -5×gDNase: gDNA извлекая агент, необходимо использовать реагент в соответствии с инструкциями по эксплуатации перед реакцией RT выполнено (внутреннее содержание глицерола не может замерзнуться, и оно не может замерзнуться, которое принадлежит нормальным явлениям).

- СМЕШИВАНИЕ 5×L-RT HEROTM: Содержит обратный Transcriptase Foregene Lncrna, и АБС битор рНКазы, DNTPS, Stabilifer, усиливающий агент, оптимизатор, Oligo (DT) праймер 18).

Features&advantages:

- Эффективная способность извлечь gDNA, которое может извлечь gDNA в шаблоне не позднее 2 минуты.

- Оно может эффективно обратить транскрипцию lncRNA. Когда обратный продукт транскрипции подвергается к qPCR, значение Ct ниже чем эта из обычной обратной системы транскрипции.

- Эффективная обратная система транскрипции, оно только требует 15 минут для того чтобы завершить синтез первого cDNA стренги.

- Сложные шаблоны: шаблоны с высоким содержанием ОБЩЕГО РУКОВОДСТВА и сложной вторичной структурой можно также обратить с высокой эффективностью.

- система транскрипции Высоко-чувствительности обратная, на уровне страниц шаблоны может также получить высококачественное cDNA.

- Обратная система транскрипции имеет высокую термическую стабильность, оптимальная температура реакции 42℃, и она все еще имеет хорошее обратное представление транскрипции на 50℃.

Требования к РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ шаблона

Самое лучшее использовать РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ извлекло от свежих образцов или сохраненный на -80 °C.

- Целостность шаблона: хорошая целостность, отсутствие ухудшения.

- Очищенность шаблона: ИОНЫ, протеины, ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ, этанол, фенолы и другие журналы, который содержат в РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЕ повлияют на для того чтобы обратить деятельность при transcriptase и в конечном счете повлиять на обратные влияния транскрипции.

Дозировка РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ шаблона

- Для lncRNA: система μl RNA/20 μg 10ng-1 полная.

- Для общей РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ: РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА μg 0.1pg-1 полные или 0.01pg-0.1 система μl μg mRNA/20.

Данные по наборов компонентные

- смешивание 5×gDNase: gDNA извлекая агент, необходимо использовать реагент в соответствии с инструкциями по эксплуатации перед реакцией RT выполнено (внутреннее содержание глицерола не может замерзнуться, и оно не может замерзнуться, которое принадлежит нормальным явлениям).

- СМЕШИВАНИЕ 5×L-RT HEROTM: Содержит обратный Transcriptase Foregene Lncrna, и АБС битор рНКазы, DNTPS, Stabilifer, усиливающий агент, оптимизатор, Oligo (DT₎ праймер ₁₈).

Меры предосторожности: (Пожалуйста прочитайте меры предосторожности осторожно перед использованием набора)

- Шаблон рекомендует использовать свежие образцы или РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА сохранила под -80 ° c (РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА должна избежать повторенного замораживани-таяния, не обеспечивающ целостность РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ, никакое ухудшение).

- Во избежание загрязнение РНКАЗЫ, экспириментально деятельность унесено в свободном от РНКаз космосе; голова оружия и центрифугу PCR необходимо гарантировать, что были свободны от РНКаз; и несите устранимые перчатки и маски.

- Перед использованием, совершенно расплавленное СМЕШИВАНИЕ смешивания GDNase 5 × и 5 × L-RT HEROTM помещено на льде для того чтобы сделать его, и светлая пуля смешана; система сформулирована, пожалуйста работает на ванне льда для того чтобы улучшить представление набора, улучшает представление характерности амплификации PCR набора.

- 5 СМЕШИВАНИЕ × L-RT HEROTM добавляло оптимизированный праймер транскрипции коэффициента обратный без добавления всех праймеров к дополнительным дополнительным праймерам.

- Для сложного шаблона РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ вторичной структуры, температуру реакции можно увеличить к 50 ° c

Поток операций:

Хранение и срок годности при хранении:

Супер наборы PCR примикса следует сохранить на -20°C. хранят продукт в холодильнике температуры постоянного на -20°C немедленно после получения. Если условия хранения соотвествующие, то продукт не ухудшит никакое представление во время периода ценности 1 года.

Проводник анализа проблемы

Последователи анализ проблем которые могут быть столкнуты в пользе наборов серии Lnc-RT HeroTM i (с gDNase), надеясь быть полезны к вашим экспериментам. К тому же, мы предназначали службу технической поддержки для того чтобы помочь вам с другое экспириментально или техническим проблемам за инструкциями по эксплуатации и вопросами. Если вы имеете любые потребности, то пожалуйста свяжитесь мы: 028-83361257 или электронная почта: Tech@foregene.com.

Неспецифичная амплификация

1. Неразумный дизайн праймера

Рекомендация: Праймеры дизайна согласно принципам проектирования праймера.

2. Выпарки генома.

Предложение: Убеждайтесь что первый шаг температуры реакции удаления gDNA 42°C, и время реакции смогите также быть расширенн к 5min.

Отсутствие сигнала амплификации RT-qPCR

1. РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА ухудшена.

Рекомендация: Материал для извлечения РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ должен быть как можно свеж, и высококачественная и высокочистая РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА должна быть использована.

2. РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА содержит иы АБС битор.

Рекомендация: Обратные иы АБС битор транскрипции вообще включают SDS, соли гуанидина, ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ, etc. порекомендованы, что моет преципитат РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ с этанолом 70% для того чтобы извлечь иы АБС битор.

3. Вопросы дизайна праймера.

Рекомендация: Согласно принципу проектирования праймера, переконструируйте праймеры для осмотра.

Диапазон цели появляется в пустой контроль

1. Загрязнение работая инструментов или реагентов.

Рекомендация: Все реагенты или оборудование для эксперимента должны быть автоклавированы. Быть осторожным и нежен при регуляции для предотвращения образцов ДНК от быть высосанным в пипетку или разлил из трубки центрифуги.

2. Загрязнение произошло во время подготовки системы реакции PCR.

Рекомендация: Примите необходимые меры предосторожности при регуляции, как: нося перчатки латекса, используя подсказки фильтра. Используйте смешивание в реальном времени PCR в загрязнени-защитной системе.

3. Праймеры ухудшены.

Предложение: Используйте электрофорез SDS-PAGE для того чтобы обнаружить ухудшены ли праймеры, и заменяйте с новыми праймерами для экспериментов по обнаружения флуоресцирования.