RT-PCR EasyTM II 2 - шаг Cat.No.RT - 02021/02022 2 - наборы PCR смешивания PCR RT шага мастерские

RT-PCR EasyTM II (2 - шаг) Cat.No.RT - 02021/02022 2 - наборы PCR смешивания шага RT-PCR мастерские

RT-PCR EasyTM II (2 - шаг)

Cat.No.RT - 02021/02022

смешивание 2-шага RT-PCR мастерское

RT-PCR EasyTM II (2 - шаг)

Cat.No.RT - 02021/02022

смешивание 2-шага RT-PCR мастерское

Для пользы исследования только

Магазин на -20℃

Внедрение продукции

RT-PCR EasyTM II (2 - шаг) содержит все реагенты для 2-шага RT-PCR, совмещающ реакцию RT и реакцию PCR в таком же наборе, обеспечивающ оптимизированное смешивание RT и смешивание PCR. Уникальное смешивание RT может синтезировать высококачественное cDNA перво-стренги легко и эффективно. 2× положительная величина смешивания PCR EasyTM имеет высокую эффективность и специфическую амплификацию. Органическое сочетание из 2 делает обнаружение гена цели более чувствительной.

Особенности

Количественный анализ в реальном времени РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ можно унести быстро и точно.

Набор использует уникальную полимеразу реагента транскрипции обратного Foregene и ДНК Foregene HotStar Taq совмещенную с уникальной системой реакции эффектно для того чтобы улучшить эффективность амплификации и характерность реакции.

Оптимизированная система реакции делает реакцию имеет более высокую чувствительность обнаружения, более сильную термическую стабильность, и лучший допуск.

Содержание набора

Условия перехода и хранения

1. Условия транспорта

Весь процесс низкотемпературного транспорта коробки льда, обеспечить что набор в государстве <4>

2. Условия хранения

Сохраненный на -20°C. храните продукт в холодильнике температуры постоянного на -20°C немедленно после получения. Если условия хранения соотвествующие, то продукт не ухудшит никакое представление во время периода ценности 1 года.

Данные по набора компонентные

Смешивание 2× RT EasyTM: Обратный Transcriptase Foregene, и АБС битор рНКазы, dNTPs, буфер реакции, оптимизатор и стабилизатор, etc.

2× положительная величина смешивания PCR EasyTM: Полимераза ДНК Foregene Taq, dNTPs, Mg2+, буфер реакции, оптимизатор и стабилизатор.

Меры предосторожности: (Пожалуйста прочитайте меры предосторожности осторожно перед использованием набора)

Реагенты должны избежать повторенный замерзать и таять, в противном случае представление реагентов уменьшит или станет инвалидным.

Для шаблонов, порекомендованы, что использует сохраненную РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ извлеченную от свежих образцов или, который на -80℃ (РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА должна избежать повторенный замерзать и таять).

Во избежание загрязнение рНКазы, деятельность эксперимента должно быть унесено в свободном от РНКаз космосе; подсказки пипетки и центрифуга PCR используемые трубки должны быть свободны от РНКаз; и устранимые перчатки и маски должны быть несены.

Этот набор необходимо использовать со специфическими праймерами для экспериментов. Пожалуйста выберите специфические праймеры для гена быть усиленным согласно потребностям эксперимента.

Перед использованием, положенное смешивание 2×RT EasyTM и смешивание 2×PCR EasyTM положительная величина на льде совершенно, который нужно расплавить, щелчок и смешивание задолго до того пользы; подготовка системы следует эксплуатирова на ванне льда для того чтобы улучшить представление набора и улучшить характерность амплификации PCR.

Меры предосторожности: (Пожалуйста прочитайте меры предосторожности осторожно перед использованием набора)

- Реагенты должны избежать повторенный замерзать и таять, в противном случае представление реагентов уменьшит или станет инвалидным.

- Для шаблонов, порекомендованы, что использует сохраненную РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ извлеченную от свежих образцов или, который на -80℃ (РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА должна избежать повторенный замерзать и таять).

- Во избежание загрязнение рНКазы, деятельность эксперимента должно быть унесено в свободном от РНКаз космосе; подсказки пипетки и центрифуга PCR используемые трубки должны быть свободны от РНКаз; и устранимые перчатки и маски должны быть несены.

- Этот набор необходимо использовать со специфическими праймерами для экспериментов. Пожалуйста выберите специфические праймеры для гена быть усиленным согласно потребностям эксперимента.

- Перед использованием, положенное смешивание 2×RT EasyTM и смешивание 2×PCR EasyTM положительная величина на льде совершенно, который нужно расплавить, щелчок и смешивание задолго до того пользы; подготовка системы следует эксплуатирова на ванне льда для того чтобы улучшить представление набора и улучшить характерность амплификации PCR.

Концентрация РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ шаблона

RT-PCR EasyTM II (2 - шаг): (система)/20μl РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ итога 0.1pg-5μg

Проводник деятельности

A-1: Подготовка материалов и реагентов

1. Подготовьте подготовленный шаблон РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (порекомендованы, что использует наборы серии набора изоляции РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ итога Foregene для извлечения и для того чтобы очистить РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ), специфические праймеры (10μM) и родственные потребляемые вещества и аппаратуры.

Примечание: Пожалуйста обеспечьте целостность РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ и попробуйте использовать РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ извлеченную от свежих образцов.

2. Положенное смешивание 2×RT EasyTM и свободное от РНКаз ddH2O на ванне льда, который нужно позволить ему расплавить естественно, и щелчок стена трубки, который нужно смешать хорошо для последующего использования.

A-2: Подготовка системы RT

Смешивание 2× RT EasyTM удобно и быстро для использования, избегающ загрязнения во время деятельности и экспириментально ошибок причиненных множественными подготовками системы реакции в наибольшей степени. При использовании, как раз примите половину тома системы реакции (например, если система реакции 20μl, то решение смешивания взятия 10μl 2×RT EasyTM), добавьте шаблон РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ и обратные праймеры транскрипции, и добавьте свободное от РНКаз ddH2O для того чтобы составить том к 20μl. Специфическая подготовка системы реакции RT может сослаться на таблицу 1 ниже.

Форма 1: Подготовка системы RT

A-3: Устанавливать программы реакции RT

1. После подготовки системы RT со ссылкой на вышеуказанную таблицу, смешивание нежной (вы можете использовать подсказку пипетки для того чтобы дунуть нежно; вы можете также смешать его на vortexer и центрифуговать его для того чтобы собрать жидкость разбросанную на стену трубки или крышку трубки, и устанавливаете его внутри готовые для использования на коробке льда).

2. См. установки программы реакции RT (таблица 2) для того чтобы установить температуру реакции, время, etc.

Примечание: Для обеспечения работы смешивания и для того чтобы улучшить свою эффективность амплификации, самое лучшее подготовить систему реакции RT после ванны металла достигает установленную температуру реакции (обратную температуру 42℃ или 50℃ транскрипции), так, что систему можно подготовить немедленно после завершения подготовки системы. Впишите программу реакции. Реакцию RT можно также выполнить на машине PCR.

Форма 2: Устанавливать программы реакции RT

Примечание: При использовании случайного праймера, реакция должна быть подогрета на 25℃ для 10min перед первым шагом реакции. Вышеуказанная процедура для ссылки только. Порекомендованы, что будут фактические условия реакции меняют в зависимости от структурных условий шаблона, праймеров, etc. для шаблонов РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ со сложными вторичными результатами, первая температура реакции 50℃.

1. Продукт реакции можно сразу использовать в последующих тестах, или хранить на -20°C на до неделя. Для долгосрочного хранения, порекомендованы, что избегает повторенный замерзать и таять на -80°C.

B: Реакция идентификации PCR

B-1: Подготовка системы реакции PCR

Используйте cDNA синтезировал в шаге a как шаблон, и выполните реакцию PCR с обеспеченной положительной величиной смешивания 2×PCR EasyTM в наборе. Положительная величина смешивания места 2×PCR EasyTM, cDNA, и свободное от РНКаз ddH2O на ванне льда для того чтобы позволить ему расплавить естественно, и щелчку стена трубки, который нужно смешать до пользы. Для специфической подготовки системы PCR, см. таблица 3 ниже.

Форма 3: 反应体系配制 подготовки системы реакции PCR

1*: Обычно окончательная концентрация праймера 0.2-0.25μM для того чтобы получить лучшие результаты. Когда представление реакции плохо, концентрацию праймера можно отрегулировать внутри ряд 0.1-0.5μM.

B-2: Установка условия реакции PCR

1. После подготовки системы PCR со ссылкой на вышеуказанную таблицу, смешивание нежной (вы можете использовать подсказку пипетки для того чтобы дунуть нежно; вы можете также смешать его на vortexer и центрифуговать его для того чтобы собрать жидкость разбросанную на стену трубки или крышку трубки, и устанавливаете его внутри готовые для использования на коробке льда).

2. См. установки программы реакции PCR (таблица 4) для того чтобы установить температуру и время реакции.

Примечание: Для обеспечения работы смешивания PCR и для того чтобы улучшить свою эффективность амплификации, самое лучшее установить условия PCR на машине PCR перед подготовкой системы PCR.

Форма 4: Установка условия реакции PCR

1*: Установите специфическое временя согласно длине усиленной части цели. Скорость амплификации полимеразы ДНК Foregene Taq 2kb/min.

Примечание: Порекомендованы условия реакции PCR меняют в зависимости от структурных условий шаблона, праймеров, etc. для шаблонов РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ со сложными вторичными структурами, его что температура реакции для первого шага обратной транскрипции 50°C. В специфической деятельности, необходимо конструировать оптимальные условия реакции, включая температуру нагрева при отжиге, время расширения, etc., согласно специфическим условиям как размер части цели, низкопробная последовательность усиленной части, и содержание ОБЩЕГО РУКОВОДСТВА и длина праймера.

Диаграмма деятельности RT-PCR