RT-QPCR EasyTM - зеленый цвет I Cat.No.RT SYBR - 02111/02112 одного смешивания PCR RT реального времени шага мастерского с краской ссылки ROX

RT-qPCR EasyTM (один шаг) - зеленый цвет I Cat.No.RT SYBR - 02111/02112 одношаговых смешиваний в реальном времени RT-PCR мастерских с краской ссылки ROX

RT-qPCR EasyTM (один шаг) - зеленый цвет I SYBR

Cat.No.RT - 02111/02112

Одношаговое смешивание в реальном времени RT-PCR мастерское

Для пользы исследования только

Магазин на -20℃

Внедрение продукции

RT-qPCR EasyTM (один шаг) - зеленый цвет Iuses SYBR уникальная система эффективного для совмещения RT и реакций в реальном времени PCR, который могут быстро выполнить количественное обнаружение генов. Продукт имеет сильный допуск, высокую характерность и стабильность. Продукт содержит полимеразу ДНК Foregene HotStar Taq компании уникальную, которая имеет преимущества более быстрой амплификации (2Kb/min), высокой эффективности амплификации, сильной специфической способности амплификации, и низкого тарифа рассогласования сравненного с обычными энзимами Taq. Он использован здесь для RT-PCR в реальном времени для уменьшения неспецифичной амплификации и для того чтобы улучшить точность PCR.

Особенности

Одношаговый набор делает обратную транскрипцию и реакциям qPCR 2 в такой же трубке, только нужно добавить РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ шаблона, специфические праймеры PCR и свободное от РНКаз ddH2O.

Набор смогите быстро и эффективно количественно проанализировать вирусную РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ или РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ трассировки.

Набор использует уникальную полимеразу реагента транскрипции обратного Foregene и ДНК Foregene HotStar Taq совмещенную с уникальной системой реакции эффектно для того чтобы улучшить эффективность амплификации и характерность реакции.

Оптимизированная система реакции делает реакцию имеет более высокую чувствительность обнаружения, более сильную термическую стабильность, и лучший допуск.

RT-qPCR EasyTM (один шаг) - набор зеленого цвета I SYBR приходит с краской ссылки ROX внутренней, могущие понадобиться для того чтобы исключить предпосылку сигнала и ошибки сигнала между колодцами, которая удобна для клиентов для использования в различных моделях количественных аппаратур PCR.

Содержание набора

Условия перехода и хранения

условия 1.Transportation

Весь процесс низкотемпературного транспорта коробки льда, обеспечить что набор в государстве <4>

2. Условия хранения

• Набор хранится на -20℃. Храните продукт в холодильнике температуры постоянного на -20℃ немедленно после получения. Если условия хранения соотвествующие, то продукт не ухудшит никакое представление во время периода ценности 1 года.
• компонент смешивания-SYBR 2×RT-qPCR EasyTM содержит зеленый цвет I SYBR, пожалуйста держит его далеко от света.

Данные по набора компонентные

Смешивание-SYBR 2× RT-qPCR EasyTM: Обратный Transcriptase Foregene, и АБС битор рНКазы, полимераза ДНК Foregene HotStar Taq, оптимизированный коэффициент dNTPs, SYBR GreenI, Mg2+, стабилизаторов, усиливающих агентов, и оптимизаторов.

Краска ссылки ROX: она вообще использована на усилителях в реальном времени PCR компаний как ABI и Stratagene для того чтобы отрегулировать разницу между трубками PCR и трубками причиненными ошибками загрузки образца PCR. Концентрация краски ссылки ROX необходима различными аппаратурами другая, и потребитель может добавить его согласно порекомендованной концентрации аппаратуры.

Меры предосторожности: (Пожалуйста прочитайте меры предосторожности осторожно перед использованием набора)

Реагенты должны избежать повторенный замерзать и таять, в противном случае представление реагентов уменьшит или станет инвалидным.

Реагенты в наборе следует быть защищены от света и сохранены на -20°C.

Порекомендованы, что использует свежие хранят извлечение образца или РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ шаблона, который на -80°C (РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА должна избежать повторенный замерзать и таять).

Во избежание загрязнение рНКазы, пожалуйста выполняет эксперимент в свободном от РНКаз космосе; подсказки пипетки и используемые трубки PCR должны быть свободны от РНКаз; и несите устранимые перчатки и маски.

Этот набор необходимо использовать со специфическими праймерами для экспериментов. Пожалуйста выберите специфические праймеры для гена быть усиленным согласно потребностям эксперимента.

Перед использованием, положенное смешивание-SYBR I 2×RT-qPCR EasyTM на льде совершенно, который нужно расплавить, щелчок и смешивание задолго до того пользы; подготовка системы следует эксплуатирова на ванне льда для того чтобы улучшить представление набора и увеличить амплификацию PCR характерность.

смешивание-SYBR 2×RT-qPCR EasyTM содержит зеленый цвет I SYBR, пожалуйста избегает сильного света.

Концентрация РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ шаблона

RT-qPCR EasyTM (один шаг) - зеленый цвет I SYBR: (система)/20μl РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ итога 0.1pg-100ng.

Проводник деятельности

: Подготовка материалов и реагентов

1. Подготовьте подготовленный шаблон РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (порекомендованы, что использует наборы серии набора изоляции РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ итога Foregene для извлечения и для того чтобы очистить РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ), специфические праймеры (10μM) и родственные потребляемые вещества и аппаратуры.

Примечание: Пожалуйста обеспечьте целостность РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ и попробуйте использовать РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ извлеченную от свежих образцов.

2. Положенное смешивание-SYBR 2×RT-qPCR EasyTM, свободная от РНКаз краска ссылки ddH2O, и 50×ROX (при необходимости) на льде для того чтобы позволить ей расплавить естественно, и щелчку стена трубки к смешиванию до пользы.

B: Подготовка системы RT-qPCR

Смешивание-SYBR 2× RT-qPCR EasyTM удобно и быстро для использования, и избегает загрязнения во время деятельности и экспириментально ошибок причиненных множественными подготовками системы реакции в наибольшей степени. При использовании, только половина тома системы реакции (например, если система реакции 20μl, то решение смешивания-SYBR взятия 10μl 2×RT-qPCR EasyTM), добавляет шаблон РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ и специфические праймеры, и добавляет свободное от РНКаз ddH2O для того чтобы составить том. См. таблица 1 ниже для специфической подготовки системы реакции RT-qPCR

Форма 1: Подготовка системы RT-qPCR

1*: Обычно окончательная концентрация праймера 0.2-0.25μM для того чтобы получить лучшие результаты. Когда представление реакции плохо, концентрацию праймера можно отрегулировать внутри ряд 0.1-0.5μM.

Примечание: Передний праймер и обратный праймер специфические праймеры для гена цели.

2*: Выберите соотвествующую окончательную концентрацию краски ссылки ROX согласно различным количественным аппаратурам PCR. Оптимальная концентрация краски ссылки ROX для общих количественных машин PCR показана в следующей таблице:

C: Установка системы реакции RT-qPCR

• После подготовки системы RT-qPCR со ссылкой на вышеуказанную таблицу, смешивание нежной (вы можете использовать подсказку пипетки к нежно пипетке; вы можете также смешать на vortexer и центрифуге кратко для того чтобы собрать жидкость разбросанную на стену трубки или крышку трубки, и месте на коробке льда для последующего использования).

2. См. установки программы реакции RT-qPCR (таблица 2) для того чтобы установить температуру и время реакции.

Примечание: Для обеспечения работы смешивания-SYBR 2×RT-qPCR EasyTM и для того чтобы улучшить свою эффективность амплификации, самое лучшее подготовить систему реакции RT-qPCR после настраивать программу аппаратуры PCR, так, что программу реакции можно вписать немедленно после подготовка системы будет выполнена.

3. Для того чтобы получить самое лучшее влияние qPCR, PCR градиента можно использовать для того чтобы оптимизировать условия реакции для различных шаблонов и различных праймеров.

Примечание: Диапазон температур расширения полимеразы ДНК Foregene Hotstar Taq обеспечил в этом наборе является следующим: 60-72℃, и самая лучшая температура расширения 72℃.

Последователи пример условий реакции RT-qPCR. Порекомендованы, что использует метод 2-шага для реакции PCR. Когда концентрация шаблона слишком низка для того чтобы причинить неспецифичную амплификацию, низкое значение Tm праймера водит к низкой эффективности амплификации или плохая повторимость кривой усиления, etc., порекомендованы, что пробует метод 3-шага для реакции PCR. См. таблица 2-1 (метод 2-шага) и таблица 2-2 (метод 3-шага) для установки условий реакции RT-qPCR.

Форма 2-1: Устанавливать программы реакции RT-qPCR (2 - шаг)

Форма 2-2: Устанавливать программы реакции RT-qPCR (шаг 3)

1*: Обратное время транскрипции можно отрегулировать согласно экспириментально потребностям. Общим эндогенным генам как β-актин только нужны 10 минут; обнаружить специфические выраженные гены, обратное время транскрипции может быть соотвественно увеличивать как необходимо.

2*: Установите специфическое временя согласно длине усиленной части цели. Скорость амплификации полимеразы ДНК Foregene HotStar Taq 2kb/min.

Примечание: Порекомендованы, что используют условия реакции PCR меняют в зависимости от структурных условий шаблона, праймеров, etc. для шаблонов РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ со сложными вторичными структурами, его 42℃ для первого шага обратной транскрипции. В специфической деятельности, необходимо конструировать оптимальные условия реакции согласно специфическим условиям как размер части цели, низкопробная последовательность усиленной части и содержание ОБЩЕГО РУКОВОДСТВА и длина праймера, включая температуру нагрева при отжиге, время расширения, etc.

Диаграмма деятельности

Меры предосторожности: (Пожалуйста прочитайте меры предосторожности осторожно перед использованием набора)

- Реагенты должны избежать повторенный замерзать и таять, в противном случае представление реагентов уменьшит или станет инвалидным.

- Реагенты в наборе следует быть защищены от света и сохранены на -20°C.

- Порекомендованы, что использует свежие хранят извлечение образца или РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ шаблона, который на -80°C (РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА должна избежать повторенный замерзать и таять).

- Во избежание загрязнение рНКазы, пожалуйста выполняет эксперимент в свободном от РНКаз космосе; подсказки пипетки и используемые трубки PCR должны быть свободны от РНКаз; и несите устранимые перчатки и маски.

- Этот набор необходимо использовать со специфическими праймерами для экспериментов. Пожалуйста выберите специфические праймеры для гена быть усиленным согласно потребностям эксперимента.

- Перед использованием, положенное смешивание-SYBR I 2×RT-qPCR EasyTM на льде совершенно, который нужно расплавить, щелчок и смешивание задолго до того пользы; подготовка системы следует эксплуатирова на ванне льда для того чтобы улучшить представление набора и увеличить амплификацию PCR характерность.

- смешивание-SYBR 2×RT-qPCR EasyTM содержит зеленый цвет I SYBR, пожалуйста избегает сильного света.