RT-QPCR EasyTM (один шаг) - Taqman Cat.No.RT - 02131/02132 одношаговых смешиваний в реальном времени RT-PCR мастерских

Cat.No.RT - 02131/02132

Одношаговое смешивание в реальном времени RT-PCR мастерское

RT-PCR EasyTM i (один шаг)

Cat.No.RT - 02011/02012

Одношаговое смешивание RT-PCR мастерское

Для пользы исследования только

Магазин на -20℃

Внедрение продукции

Продукты серии Foregene одношаговые RT-PCR EasyTM осуществляют что интегрированная реакция от РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ к, который двух-сели на мель ДНК, т.е., обращает транскрипцию и амплификация PCR завершен в такой же трубке центрифуги реакции и такая же система реакции, которая упрощает экспириментально шаги, оптимизирует экспириментально программу, и улучшает эффективность эксперимента.

RT-qPCR EasyTM (один шаг) - Taqman используя полимеразу ДНК Foregene HotStar Taq, оптимизированная система qPCR Taqman смогите быстро и специфически выполнить количественное обнаружение RT-qPCR в реальном времени шаблонов РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ трассировки.

Особенности

- Одношаговый набор включает обратную транскрипцию и PCR, который нужно унести в такой же трубке, только нужно добавить РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ шаблона, специфические праймеры PCR и свободное от РНКаз ddH2O.

- Количественный анализ в реальном времени вирусной РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ или РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ трассировки можно унести быстро и точно.

- Набор использует уникальную полимеразу реагента транскрипции обратного Foregene и ДНК Foregene HotStar Taq совмещенную с уникальной системой реакции эффектно для того чтобы улучшить эффективность амплификации и характерность реакции.

- Оптимизированная система реакции делает реакцию имеет более высокую чувствительность обнаружения, более сильную термическую стабильность, и лучший допуск.

- RT-qPCR EasyTM (один шаг) - набор Taqman приходит с краской ссылки ROX внутренней, могущие понадобиться для того чтобы исключить предпосылку сигнала и ошибки сигнала между колодцами, которая удобна для пользователей для использования в различных моделях количественных аппаратур PCR

Контроль качества продукции

Согласно системе управления качеством FOREGEN полной (системе управления качеством FOREGENE полной), каждая серия наборов RT-PCR EasyTM i (один шаг) строго испытана множественные времена обеспечить качество, надежность и стабильность каждой серии наборов.

Содержание набора

Условия перехода и хранения

условия 1.Transportation

Весь процесс низкотемпературного транспорта коробки льда, обеспечить что набор в государстве <4>

2. Условия хранения

RT EasyTM я хранюсь на -20°C. храню продукт в холодильнике температуры постоянного на -20°C немедленно после получения. Если условия хранения соотвествующие, то продукт не ухудшит никакое представление во время периода ценности 1 года.

Данные по набора компонентные

Смешивание 2× RT-PCR EasyTM: Обратный Transcriptase Foregene, полимераза ДНК иа АБС битор рНКазы, Foregene HotStar Taq, dNTPs, Mg2+, буфер реакции, оптимизатор и стабилизатор, etc.

Меры предосторожности: (Пожалуйста прочитайте меры предосторожности осторожно перед использованием набора)

Для шаблонов, порекомендованы, что использует сохраненную РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ извлеченную от свежих образцов или, который на -80℃ (РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА должна избежать повторенный замерзать и таять).

Во избежание загрязнение рНКазы, деятельность эксперимента должно быть унесено в свободном от РНКаз космосе; подсказки пипетки и центрифуга PCR используемые трубки должны быть свободны от РНКаз; и устранимые перчатки и маски должны быть несены. Перед использованием, положите смешивание 2×RT-PCR EasyTM на лед совершенно для того чтобы расплавить, щелчок и смешивание задолго до того пользы; подготовка системы следует эксплуатирова на ванне льда для того чтобы улучшить представление набора и характерность амплификации PCR.

Концентрация РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ шаблона

RT-PCR EasyTM i (один шаг): (система)/20μl РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ итога 0.1pg-1μg

Применение набора

- Этот набор использован для быстрого обнаружения высоко-экземпляра и генов низко-экземпляра.

- Особенно соответствующее для быстрого обнаружения шаблонов РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ с высокой структурой содержания или сложной ОБЩЕГО РУКОВОДСТВА вторичной.

Контроль качества продукции

Согласно системе управления качеством FOREGEN полной (системе управления качеством FOREGENE полной), каждая серия наборов RT-PCR EasyTM i (один шаг) строго испытана множественные времена обеспечить качество, надежность и стабильность каждой серии наборов.

Проводник деятельности

: Подготовка материалов и реагентов

1. Подготовьте подготовленный шаблон РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (порекомендованы, что использует наборы серии набора изоляции РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ итога Foregene для извлечения и для того чтобы очистить РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ), специфические праймеры (10μM) и родственные потребляемые вещества и аппаратуры.

Примечание: Пожалуйста обеспечьте целостность РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ и попробуйте использовать РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ извлеченную от свежих образцов.

2. Смешивание места 2× RT-PCR EasyTM и свободное от РНКаз ddH2O на ванне льда, который нужно позволить ему расплавить естественно, и щелчок стена трубки, который нужно смешать хорошо для последующего использования.

B: Подготовка системы RT-PCR

Смешивание 2×RT-PCR EasyTM удобно и быстро для использования, избегающ загрязнения во время деятельности и экспириментально ошибок причиненных множественными подготовками системы реакции в наибольшей степени. При использовании, только половина тома системы реакции (например, если система реакции 20μl, то решение смешивания взятия 10μl 2×RT-PCR EasyTM), добавляет соотвествующее количество шаблона РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ и специфических праймеров, и добавляет свободное от РНКаз ddH2O для того чтобы составить том. См. таблица 1 ниже для специфической подготовки системы реакции RT-PCR.

Форма 1: Подготовка системы RT-PCR

1*: Обычно окончательная концентрация праймера 0.2-0.25μM для того чтобы получить лучшие результаты. Когда представление реакции плохо, концентрацию праймера можно отрегулировать внутри ряд 0.1-0.5μM.

Примечание: Передний праймер и обратный праймер специфические праймеры для гена цели; система 50μl, пожалуйста ссылается на систему 20μl для того чтобы отрегулировать дозировку реагента пропорционально.

C: Устанавливать программы реакции RT-PCR

• После подготовки системы RT-PCR со ссылкой на вышеуказанную таблицу, смешивание нежной (вы можете использовать подсказку пипетки для того чтобы дунуть нежно; вы можете также смешать на vortexer и центрифуге кратко для того чтобы собрать жидкость разбросанную на стену трубки или крышку трубки, и месте на коробке льда для последующего использования).

2. См. установки программы реакции RT-PCR (таблица 2) для того чтобы установить температуру и время реакции.

Примечание: Для обеспечения работы смешивания 2×RT-PCR EasyTM и для того чтобы улучшить свою эффективность амплификации, самое лучшее подготовить систему реакции RT-PCR после устанавливать программу аппаратуры PCR, так, что программу реакции можно вписать немедленно после система будет подготовлена.

Форма 2: Установка системы реакции RT-PCR

Примечание: Вышеуказанная процедура для ссылки только. Порекомендованы, что будут фактические условия реакции меняют в зависимости от структурных условий шаблона, праймеров, etc. для шаблонов РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ со сложными вторичными структурами, температура реакции для первого шага обратной транскрипции 50°C. В специфической деятельности, необходимо конструировать оптимальные условия реакции, включая температуру нагрева при отжиге, время расширения, etc. согласно специфическим условиям размера части цели, низкопробную последовательность усиленной части, и содержание ОБЩЕГО РУКОВОДСТВА и длину праймера.
Диаграмма деятельности RT-PCR

Обратный Transcriptase Foregene

Transcriptase обратного Foregene может обеспечить сильно эффективную и специфическую обратную реакцию транскрипции. Обратное transcriptase показывает высокое сродство и все еще поддерживает хорошую обратную деятельность при транскрипции на температуре реакции 50°C. Оно может хорошо обратить транскрибирует РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ со сложной вторичной структурой которую другие обратные transcriptases не могут отрегулировать. Обратный Transcriptase Foregene имеет высокую чувствительность и применимо в широком диапазоне количества РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ (0.1pg≤RNA≤1μg).

Полимераза ДНК Foregene HotStar Taq

Обеспечивает сильно специфическую амплификацию PCR. Когда обратная транскрипция в прогрессе, полимераза ДНК совершенно недействительна и не мешает обратную реакцию транскрипции. После программы реакции PCR, нагретой к 94°C, активирована полимераза ДНК и обратное transcriptase деактивировано. Процесс горяч-начала исключает образование неспецифичных обжигая праймеров и димеров праймера в первом цикле, обеспечивающ высокие характерность и надежность амплификации PCR.

Предосторежение: (Пожалуйста прочитайте меры предосторожности осторожно перед использованием набора)

- Реагенты должны избежать повторенный замерзать и таять, в противном случае представление реагентов уменьшит или станет инвалидным.

- Порекомендованы, что использует свежие хранят извлечение образца или РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ шаблона, который на -80℃ (РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА должна избежать повторенный замерзать и таять).

- Во избежание загрязнение рНКазы, деятельность эксперимента должно быть выполнено в свободном от РНКаз космосе; подсказки пипетки и используемые трубки PCR должны быть свободны от РНКаз; и устранимые перчатки и маски должны быть несены.

- Этот набор необходимо использовать со специфическими праймерами для экспериментов. Пожалуйста выберите специфические праймеры для гена быть усиленным согласно потребностям эксперимента.

- Перед использованием, положите смешивание 2× RT-PCR EasyTM на лед совершенно для того чтобы расплавить, щелчок и смешивание задолго до того пользы; подготовка системы следует эксплуатирова на ванне льда для того чтобы улучшить представление набора и характерность амплификации PCR.

- Ванна льда

Само-подготовленные реагенты

- Шаблон РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ

- Праймеры PCR Джин специфические

Безопасность

       - Этот продукт для пользы научного исследования только, пожалуйста не использует его в медицине, клинической медицине, еде и косметиках.

       - Одежды лаборатории носки соответствующие, перчатки, защитные стекла, etc. при использовании химикатов.

Отрицательный контроль имеет слишком высокое значение флуоресцирования

1. Загрязнение реагента причиненное во время деятельности.

Рекомендация: Замените на новые реагенты для экспериментов по RT-PCR.

2. Загрязнение произошло во время подготовки системы реакции PCR. Рекомендация: Примите необходимые предохранительные меры во время деятельности, как: нося перчатки латекса, используя подсказку пипетки с фильтром, etc.

3. Праймеры ухудшены, и ухудшение праймеров приведет к неспецифичной амплификации.

Предложение: Используйте электрофорез SDS-PAGE для того чтобы обнаружить ухудшены ли праймеры, и заменяйте их с новыми праймерами для экспериментов по RT-PCR.

Плохая повторимость количественных значений

1. Аппаратура работает неправильно.

Предложение: Могут быть ошибки между каждым отверстием PCR машины PCR, приводящ в плохой воспроизводимости во время управления или обнаружения температуры.

Пожалуйста унесите тест согласно инструкциям соответствуя аппаратуры.

2. Очищенность образца не хороша.

Рекомендация: Нечистые образцы приведут к плохой воспроизводимости эксперимента, который включает очищенность шаблона и праймеров. Самое лучшее repurify шаблон, и праймеры наиболее хорошо очищены SDS-PAGE.

3. Подготовка и продолжительность хранения системы PCR слишком длинны.

Предложение: Используйте систему RT-PCR для экспериментов по PCR немедленно после подготовки, и не выходите она слишком долго; порекомендованы, что настраивает программу PCR перед продолжением с подготовкой системы RT-PCR.

4. Условия амплификации PCR не соответствующие, и последовательность или концентрация праймера неправильны.

Предложение: подтвердите правильность последовательности праймера и праймер не был ухудшен; когда сигнал амплификации не хорош, попробуйте отрегулировать температуру нагрева при отжиге и отрегулировать концентрацию праймера соотвественно.